021-55781681021-55781681
日常液相分析中，異常峰型是困擾實驗人員的難題之一。上期我們就肩峰的處理進行了介紹，本期我們將會對拖尾峰的排查與解決進行討論。
首先，我們先要對拖尾峰進行了解，
那么具體什么樣的峰型可以稱為拖尾峰呢？
2020版中國藥典四部0512高效液相色譜法對拖尾因子（T）有所定義。
當以峰高作定量參數(shù)時，除另有規(guī)定外，T值應在0.95~1.05之間。以峰面積作定量參數(shù)時，一般的峰拖尾或前伸不會影響峰面積積分，但嚴重拖尾會影響基線和色譜峰起止的判斷和峰面積積分的準確性，此時應在品種正文項下對拖尾因子作出規(guī)定。這時我們發(fā)現(xiàn)，2020版中國藥典對于拖尾峰有兩種情況，一種為峰高定量，另一種為峰面積定量，各有不同解釋。
藥典內(nèi)容
—節(jié)選自2020版中國藥典二部抑制肽
(圖片來源網(wǎng)絡）
國家藥典委對于2025版中國藥典0512高效液相色譜法修訂草案也已公示，其中明確規(guī)定了拖尾因子的范圍。原文如下：除另有規(guī)定外，在檢查和含量測定項下，以峰面積作定量參數(shù)時，T值應在0.8～1.8之間；以峰高作定量參數(shù)時， T值應在0.95～1.05之間。以峰面積作定量參數(shù)時，一般的峰拖尾或前伸不會影響峰面積積分，但嚴重拖尾會影響基線和色譜峰起止的判斷和峰面積積分的準確性，此時應在品種正文項下對拖尾因子予以規(guī)定。(圖片來源網(wǎng)絡）
那么當我們發(fā)現(xiàn)日常分析中拖尾因子
不符合藥典規(guī)定時該如何處理呢？
我們可以按照以下原因進行排查。
流動相及試劑
① 流動相pH
當流動相pH處于化合物pKa附近時可能會出現(xiàn)化合物處于離子態(tài)與分子態(tài)共同出現(xiàn)的情況，此時可能出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象?？梢钥紤]將流動相pH調(diào)整至化合物pKa±2的范圍以避免此類現(xiàn)象。
② 進樣溶劑
當進樣溶劑洗脫強度強于初始比例流動相時，可能出現(xiàn)溶劑效應。拖尾峰是溶劑效應的現(xiàn)象之一。可以考慮使用初始比例流動相作為進樣溶劑，或使用溶劑效應消除器。
樣品問題
①雜質(zhì)
樣品中混有雜質(zhì)干擾化合物峰型，導致出現(xiàn)峰拖尾情況。可以考慮前處理中對雜質(zhì)進行去除，或是調(diào)整分析方法分離雜質(zhì)。
②樣品過載
樣品進樣量過高導致過載時也可能產(chǎn)生拖尾情況?？梢钥紤]降低進樣量，或?qū)悠愤m當稀釋。
色譜柱
①封端不充分
封端不充分或不封端的色譜柱，在分析堿性化合物時常會發(fā)生拖尾現(xiàn)象，其原因是樣品與色譜柱硅膠顆粒表面上的酸性或離子化硅羥基之間發(fā)生相互作用導致拖尾。此時可以考慮更換為封端更為完善的色譜柱或者是添加掃尾劑三乙胺等添加劑優(yōu)化峰型。
②篩板堵塞
當色譜柱篩板堵塞時可能會出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，主要是因為化合物無法同時穿過篩板，出現(xiàn)了前后不同的通過時間，導致譜峰擴散拖尾?？梢钥紤]進行色譜柱沖洗以及加裝固體顆粒物過濾部件。。
③柱效降低
當色譜柱長時間使用后，色譜柱柱效逐漸下降是拖尾發(fā)生的原因之一?？梢钥紤]進行色譜柱沖洗或更換新柱。
關于我們 | 鯤霆生物
上海鯤霆生物科技有限公司深耕生物醫(yī)藥行業(yè)多年，自創(chuàng)立之初就以為生物醫(yī)藥企業(yè)提供從研發(fā)分析到工業(yè)生產(chǎn)的整體化服務為愿景。不斷鉆研色譜分析及制備技術，提升服務品質(zhì)，致力于成為值得信賴的色譜技術服務提供商。
鯤霆生物現(xiàn)為Nouryon旗下品牌 Kromasil液相色譜柱及制備填料中國區(qū)總代理。主營業(yè)務為代理銷售各類實驗室精密儀器、試劑耗材以及相關領域的技術開發(fā)與咨詢服務。
鯤霆生物愿與您攜手同行，共同前進，為更健康，更安全的生物醫(yī)藥而不懈努力。
當前位置：